怎樣正確的復蘇細胞
細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢?沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態檢查的作用何在?不羅嗦了，請看下文：
活力檢查 – 千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發現有污染毫不猶豫的丟棄!形態檢查 – 檢查細胞的固有形態和生長行為。
凍存細胞：
補充新的培養液 – 在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養液。
在細胞長至70%單層時收獲細胞，計數活細胞數，用凍存液調整細胞密度 ~5 x106 cells/ml (根據不同的細胞類型調整)
凍存液 – 用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據細胞類型選擇zui合適的凍存液(常用的凍存液成分有):
– 5-10% DMSO – 注意確保DMSO不含有其他的毒性物質。
– 5-15% 甘油
– 如果細胞在無血清培養基內生長，應在50%條件培養基內(細胞在無血清培養基內生長24小時)內凍存和復蘇。
在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過1.5ml。
程序降溫是保證凍存細胞活性的關鍵，使用 Mr. Frosty(找生物注一種裝置)保證降溫速度為1°-3°C，置于-80°C冰箱內過夜，如果沒有Mr. Frosty裝置，可以使用實驗室常見的泡沫盒、棉花等
放入液氮罐之前記錄凍存管的數量和位置。以zui快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的!
細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
上海通蔚生物科技有限公司
地址：上海市金山區楓涇鎮環東一路65弄2號3463室
主營產品：酶聯免疫試劑盒，食品農殘檢測，細胞系，培養基，胎牛血清
©2019 版權所有：上海通蔚生物科技有限公司 備案號：滬ICP備14033764號-3 總訪問量：1296949 站點地圖 技術支持：環保在線 管理登陸